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中文：乳酸氧化酶
英文：LOX
CAS：9028-72-2
分子式：C2H6
纯度：≥90%
货期：24h
货号：HH6201
规格：1ku
中文同义词：乳酸氧化酶;乳酸氧化酶, 来源于绿色气球菌, 20 单位/毫克;L-乳酸氧化酶
英文同义词：Lactate Oxidase
技术指标
外观:黄色无定型冻干粉末;蛋白纯度: ≥90%; 比活性:≥20 U/mg酶粉; 丙酮酸氧化酶:≤0.001%; 胆碱氧化酶:≤0.001%; 尿酸酶:≤0.001%; 葡萄糖氧化酶:≤0.001%
酶学性质
来源: 微生物; 分类: EC 1.1.3.2; 分子量: 42kDa (SDS-PAGE); 等电点: pH 4.6; Km值:7.5×10-4 M(L-Lactate); 最适pH:6.0-7.0; 最适温度: 50°C; pH稳定性:pH 6.0-8.5(25°C,16 h); 热稳定性:50℃ 以下稳定（pH 7.0,30 min）; 稳定性:-25～-15℃ 静置保存 12 个月保持 90% 以上活性. 用途: 用于乳酸含量的检测
酶活定义
单位酶活定义为在下述条件下，每分钟催化生成 1μmol H2O2 所需的酶量。
试剂准备
试剂I：0.2 M pH 6.5 磷酸钾缓冲液。
试剂II：1kU/mL 过氧化物酶（POD）溶液。
试剂III：50 mM 4-AA 溶液。
试剂IV：0.5 M DL- 乳酸溶液，pH 6.5。
试剂V：50 mM TOOS 溶液。
酶稀释液：10 mM pH 7.0 磷酸钾缓冲液含 10μM FAD。
样品：用酶稀释液将酶稀释至 0.05-0.2U/mL。
按如下配制反应混合物：试剂 I:10 ml; 试剂 II:0.25 mL; 试剂 III:1.5 mL; 试剂 IV:5 mL; 试剂 V:1.5 mL; 双蒸水补充到 50 ml
操作步骤
1. 向1 mL 比色皿中加入反应 1 mL 反应混合液。
2. 将反应混合物在 37°C 预热 5 min。
3. 加入 20μL 待测酶液，混匀。
4. 在 555 nm 处测定 37°C 反应，记录1 min内的吸光度变化（ΔAs）。
*用酶稀释液替代酶液，其它步骤相同，所得溶液吸光度为空白吸光度（ΔAb）ΔA=ΔAs-ΔAb
技术指标:
外观:白色无定型冻干粉末；蛋白纯度:≥90%；比活性:≥200 U/mg酶粉；NADH/NADPH 氧化酶:≤0.01%；苹果酸脱氢酶:≤0.005%；谷氨酸脱氢酶:≤0.003%；丙酮酸激酶:≤0.03%
酶学性质
来源: 微生物；分类: EC 1.1.1.28；分子量: 45 kDa(SDS-PAGE)；等电点: 4.5；Km值：2.2×10-6 M (丙酮酸)；抑制剂：Ag+，Hg2+；最适pH：6.5-7.0；最适温度：45℃；pH稳定性 5.5-10.0 (25℃,16 h)；热稳定性 50℃ 以下稳定 (pH 7.0,30 min)；稳定性：-25～-15℃ 静置保存 12 个月保持 90% 以上活性；保护剂：BSA。
用途：用于谷草转氨酶，谷丙转氨酶等试剂的研发和大量配制。
酶活定义
单位酶活定义为在下述条件下，每分钟氧化 1μmol NADH 所需的酶量。
试剂准备
试剂I：称取 0.04 g 丙酮酸钠，用 0.1 M,pH7.7 Tris-HCl 缓冲液溶解并定容至 100 mL。
试剂II：称取 2.11 g CAPS，用 80 mL 水溶解，用 NaOH 调节 pH 至 9.7，加入120 mg NADH，用双蒸水定容至 100 mL。
酶稀释液：10 mM,pH 7.0 磷酸钾缓冲液，并加入 BSA 至终浓度 0.1%。
样品：用预冷的酶稀释液将酶稀释至 1-2U/mL。
操作步骤
1. 向1 mL比色皿中加入1 mL试剂I，20μL待测样品，混匀。
2. 将反应混合物在37℃预热5 min。
3. 向反应混合物中加入 0.2 mL 试剂II，混匀，37℃ 反应，并用分光光度计在 340 nm下，记录 1 min 内的吸光度变化（ΔAs）
*用酶稀释液替代酶液，其它步骤相同，所得溶液吸光度为空白吸光度（ΔAb）ΔA=ΔAs-ΔAb
