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RT-LAMP核酸扩增试剂(荧光法)

英文名称:Fluorescent Master Mix
货号: HMD5203-01 HMD5203-02 HMD5203-03
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选择规格: 100 rxn 1000 rxn 10000 rxn
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中文:RT-LAMP核酸扩增试剂(荧光法)
英文:Fluorescent Master Mix
纯度:≥90%
货期:24h
货号:HMD5203-01
规格:100 rxn
中文同义词:RT-LAMP 核酸扩增试剂(荧光法)
英文同义词:Fluorescent Master Mix,

产品描述

本产品中包含反应缓冲液、BstL DNA 聚合酶和耐热型反转录酶的 RT-Enzymes Mix、冻干保护剂和荧光染料组分。其中反应缓冲液中含 Mg2+,dNTP 等扩增必须组分,使用时只需要将 Buffer、反应酶、荧光染料、引物混合并加入模板即可;若添加冻干保护剂可进一步配置可冻干体系。

应用:适用于 DNA、RNA 等温扩增。运输与保存方法:干冰运输,-25~-15℃ 保存。避免反复冻融,产品有效期12月。

实验流程

1)将 Buffer 取出解冻,使用前充分涡旋混匀,并短暂离心收集液体至管底。

2)反应体系按下表配制

备注:

10×Primer Mix 浓度:16μM FIP/BIP,

2μM F3/B3,4μM Loop F/B。核酸模板建议使用 DEPC 水溶解。

3)扩增反应:在荧光 PCR 仪(如ABI7500等)上设置如下程序。

注意事项

1)Buffer 融化后可能会有白色沉淀,在室温下充分混匀即可澄清。

2)反应温度可根据引物情况在 62℃-68℃ 间进行优化。

3)实验应规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样等过程。为避免污染,建议在超净台中配制反应体系,在其他房间的通风橱中加入模板以免产生假阳性干扰。

Q:RT-LAMP核酸扩增试剂(红黄显色法)

产品描述

本产品组分中已包含反应缓冲液,Mg2+,dNTP,显色染料,BstL DNA 聚合酶和耐热型反转录酶,使用时只需要将反应酶,Buffer, 引物混合并加入模板即可。

本产品为红黄变色反应,在扩增完成后,阳性结果为黄色,阴性结果为红色,通过肉眼观察即可对反应结果进行判读。

应用

适用于 DNA、RNA 等温扩增。

运输与保存方法

冰袋运输,-25~-15℃ 保存。避免反复冻融,产品有效期 12 月。

实验流程

1)将 Buffer 取出,冰上解冻,使用前涡旋10 s混匀,并短暂离心收集。

2)反应体系按下表配制:10×Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16μM,LoopF/B 分别为 4μM,F3/B3 分别为 2μM。

3)65°C 恒温孵育 30-45min,可根据颜色变化适当延长反应时间。

4)肉眼观察结果,黄色为阳性,红色为阴性。

注意事项

1.Buffer 需要在室温充分融化,使用完毕后于 -25~-15℃ 保存。

2.分装后的试剂应避免长时间暴露于空气中。

3.红黄变色反应依赖反应体系的pH变化,请不要使用含Tris的核酸保存溶液,建议使用 ddH2O 保存的核酸。

Q:RT-LAMP 荧光法预混液 (冻干球)

产品描述

RT-LAMP 荧光法预混液 (冻干球)插图

本产品中包含反应缓冲液、Bst DNA 聚合酶和耐热型反转录酶的 RT-Enzymes Mix、冻干保护剂和荧光染料组分。其中反应缓冲液中含Mg2+,dNTP 等扩增必须组分。产品为冻干球剂型,使用时只需要加入引物和模板即可。产品组分组分 HMD 5209-01, HMD 5209-02; HMD 5209-03。

应用:适用于 DNA、RNA 等温扩增。运输与保存方法:2~8℃ 运输,2~8℃ 保存;产品有效期 12 个月。

实验流程

1)根据测试数取出相应个数的冻干球。

2)反应体系配制

RT-LAMP 荧光法预混液 (冻干球)插图1

备注:

a.10×Primer Mix浓度:16μM FIP/ BIP,2μMF3 / B3,4μM Loop F /B;

b.核酸模板建议使用 DEPC 水溶解。

3)扩增反应

在荧光PCR仪(如 ABI 7500 等)上设置如下程序

RT-LAMP 荧光法预混液 (冻干球)插图2

注意事项

1)反应温度可根据引物情况在 62℃ – 68℃ 间进行优化;

2)实验应规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样等过程;

3)为避免污染,建议在超净台中配制反应体系,在其他房间的通风橱中加入模板以免产生假阳性干扰。

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