产品信息

产品描述

核糖核酸酶 A（Ribonuclease A，常用缩写RNase A），一种含 4 个二硫键的单链多肽，分子量约为 13.7 kDa（氨基酸序 列）。作为一种核糖核酸内切酶（endoribonuclease），特异性降解单链 RNA 上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）残基。具体来 说，切割识别的是由某核苷酸上的 5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸 3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键，从而使得 2’, 3’-环 磷酸水解为对应的 3’-核苷磷酸（比如，pG-pG-pC-pA-pG经 RNase A 切割产生 pG-pG-pCp 和 APG）。RNase A 切割单链 RNA 活性最高，推荐工作浓度为 1-100 μg/mL，兼容于各种反应体系。低盐浓度（0-100 mM NaCl），可用来切割单链 RNA， 双链 RNA，以及 RNA-DNA杂交形成的 RNA 链。然而，高盐浓度（≥0.3 M），RNase A 仅特异性切割单链 RNA。核糖核酸酶 A（RNase A）最常见的应用在于质粒 DNA 或基因组 DNA 制备过程中去除RNA，此制备过程中 DNase 酶活性的存在与

否是需要重视的污染之一，可采用水浴煮沸这种传统方法来灭活 DNase 活性。另外，本品还可用于 RNA 酶保 护分析、RNA 序列分析等分子生物学实验。

运输与保存方法

冰袋运输。-25~-15℃干燥保存。有效期 2年。

储存液制备

【注】：此为 RNase A 储存液配制的常用方法之一，也可以根据实验室传统的方法，或者参考文献资料使用其他方法制备 储存液（如直接溶于 10 mM Tris-Cl, pH7.5；或者 TrisNaCl 溶液）。

1）利用 10 mM 的醋酸钠（pH5.2）制备 10 mg/mL 的 RNase A 储存液；

2）100℃加热 15 min；

3）冷却到室温，加入1/10 体积的 1 M Tris-HCl（pH7.4），调其pH 至 7.4（例如，5 mL 10 mg/mL 的 RNase储存液加入 500 μL 1 M Tris-HCl, pH7.4）；

4）分装于-25~-15℃冻存，可稳定保存长达 2年。 【注】：在中性条件下煮沸 RNase A 溶液，会有 RNase 沉淀形成；在更低的 pH 下将其煮沸，如有沉淀可以观察到，可能由 于蛋白杂质存在造成。煮沸之后若发现沉淀，可通过高速离心（13,000 rpm）去除杂质，然后分装冻存。

注意事项

1）本品在生产过程中已经过相应方法去除DNase 污染，对于常规质粒 DNA 或者基因组DNA 抽提（不需要严格定量 DNA 水平）的应用，可不需要高温煮沸，直接配制母液即可。对于需要严格控制 DNase 酶残留的实验，建议高温煮沸或者购买 DNase-free,protease-free 的 RNase A 溶液（10 mg/mL）。

2）RNase A 会强吸附在玻璃器皿上，建议溶液装到塑料离心管内。

3）对于同时操作完整RNA 实验的研究人员，一定要谨防 RNase A引入干扰试验结果的准确性。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5) 本产品仅作科研用途！

产品信息

产品描述

脱氧核糖核酸酶 I (DNase I)是一种可消化单链或双链 DNA 的脱氧核糖核酸内切酶，它识别并切割磷酸二酯键，产生 5’端为磷酸基团，3’端为羟基的单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。DNase I 的活性依赖于 Ca 2+ ,并可被二价金属离子如 Mn 2+ , Zn 2+等激活。5mM Ca 2+可保护酶使其不被水解。而在Mg 2+存在下，该酶可随机识别和切断 DNA任一链上的任意位点；而在 Mn 2+存在的条件下，可同时识别 DNA 的两条链并在几乎相同的位点进行切割，形成平末端或有 1-2 个核苷酸突出的粘末端 DNA 片段。

产品性质

牛胰腺 DNase I 在酵母表达体系中表达并分离纯化得到。

运输与保存方法

储存稳定性： -15℃~-25℃保存

运输稳定性： 冰袋运输

酶 存 储 液 ： 10mM Tris-HCl, 2mM CaCl2,50% glycerol, pH 7.6 @25℃。

单位定义

活力定义：1 活力单位（U）指在 37℃条件下，10 分钟完全降解 1μg pBR322 DNA 所需要的酶量。

质量控制

RNase 活性：5 U 的本品和 1.6 μg MS2 RNA 在 37℃下反应 4 小时，RNA 的电泳谱带不发生变化。

使用说明

1. 在RNase-free反应管中按照下表比例配制反应液：

①根据 RNA 的量，计算需要加入的 DNase I

体积。

2. 37℃孵育 15min；

3. 加 入 0.5M EDTA 至 终 浓 度 为 2.5mM~5mM 后，65℃加热 10min 终止反应，样本可直接进行下一步反应如反转录实验。

注意事项

1. 0.5M EDTA 需自备。

2. 每µg RNA 使用 1 U DNase I，如果RNA 少于 1 µg，请使用 1 U DNase I。

3. 使用时请将酶置于冰上操作。

产品信息

产品描述

本品为无色液体溶液。适合用于 PCR 扩增、real-time PCR、cDNA 或普通 DNA 合成、DNA 测序和标记等各种常规分子生物学实验。可用超纯水稀释，并用高纯度 NaOH 溶液调节 pH 值至 7.0，纯度≥99%（HPLC）。经检测，不含 DNase、RNase、phosphatase。可以直接用于 PCR 等各种常规分子生物学反应。

运输与保存方法

冰袋运输，-25～-15 ℃保存。避免反复冻融，

产品有效期 2 年。

注意事项

1）可以室温溶解，溶解后宜存放于冰盒内或冰浴上，使用完毕后应立即置于-25～-15 ℃保存。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品信息

产品描述

本品为无色液体溶液。适合用于 PCR 扩增、real-time PCR、cDNA 或普通 DNA 合成、DNA 测序和标记等各种常规分子生物学实验。可用超纯水稀释，并用高纯度 NaOH 溶液调节 pH 值至 7.0，纯度≥99%（HPLC）。经检测，不含 DNase、RNase、phosphatase。可以直接用于 PCR 等各种常规分子生物学反应。

运输与保存方法

冰袋运输，-25～-15 ℃保存。避免反复冻融，

产品有效期 2 年。

注意事项

产品信息

产品描述

本品为无色液体溶液。适合用于 PCR 扩增、real-time PCR、cDNA 或普通 DNA 合成、DNA 测序和标记等各种常规分子生物学实验。可用超纯水稀释，并用高纯度 NaOH 溶液调节 pH 值至 7.0，纯度≥99%（HPLC）。经检测，不含 DNase、RNase、phosphatase。可以直接用于 PCR 等各种常规分子生物学反应。

运输与保存方法

冰袋运输，-25～-15 ℃保存。避免反复冻融，

产品有效期 2 年。

注意事项

1）可以室温溶解，溶解后宜存放于冰盒内或冰浴上，使用完毕后应立即置于-25～-15 ℃保存。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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产品概述

Taq DNA 聚合酶是一种耐热的 DNA 聚合酶，来源于水生栖热菌（Thermus aquaticus YT-1），该酶具有 5' → 3'的聚合酶活性和双链特异性 5' → 3'的核酸外切酶活性。

运输与保存方法

≤0℃运输；-25～-15℃保存。

单位定义

使用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，74℃，30 min 内，摄入 10 nmol 的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为 1 个活性单位（U）。

质量控制

蛋白纯度（SDS-PAGE）：通过 SDS-PAGE分析，Taq DNA 聚合酶纯度≥95%；核酸内切酶残留检测：5 U 本酶和 1 μg λ DNA 在 37℃下反应 16 小时，琼脂糖凝胶电泳 DNA 谱带不发生变化；核酸外切酶残留检测：5 U 本酶和 1 μg -Hind Ⅲ digest DNA 在 37℃下孵育 16 小时，琼脂糖凝胶电泳 DNA 谱带不发生变化；Nickase 残 留 检 测 ： 5 U 本 酶 和 1 μ g pBR322 DNA 在 37℃下孵育 16 小时，琼脂

糖凝胶电泳 DNA 谱带不发生变化；RNase 残留检测： 5 U 本酶和 1.6 μg MS2 RNA 在 37℃下孵育 16 小时，琼脂糖凝胶电泳 RNA 谱带不发生变化；

大肠杆菌 DNA 残留检测：5 U 本酶中残留的核酸经 E.coli 16s rDNA 特异性的 TaqManqPCR 检测，E.coli 基因组残留≤1 拷贝；5kb λ DNA 扩增： 50µl 反应体系中含有 5ng λ DNA 和 5 U 本品进行 25 个 PCR 扩增循环，可以得到预期的 5.0 kb 产物。

产品信息

产品概述

Uracil-DNA Glycosylase（UDG）酶可通过催化水解含有 U-DNA 位点 DNA 链的尿嘧啶糖苷键（碱基切除），释放尿嘧啶并产生碱敏感的无嘧啶基位点（AP-DNA）。该酶可作用于含尿嘧啶的单链和双链 DNA，对双链DNA 的活性低于单链 DNA。该酶对小的U-DNA 寡核苷酸和 dUMP 有活性，但对RNA 或正常的无尿嘧啶 DNA 无活性。该酶无金属离子要求，所以在 Mg 2+或 EDTA 的存在下是有活性的；但甘油、Mg 2+和高离子强度可以降低该酶的活性。

运输及保存方法

-25℃到-15℃保存一年。

注意事项

来自 BMTU 3346 的 UDG 酶比来自大肠杆菌的相应的酶（95℃10min）可以更快灭活（在 95℃ 2min）酶储存液

•20mM Tris-HCl，pH 8.0（4℃），0.1mMEDTA，100mM KCl，1mM DTT，50%甘油，0.5%Nonidet，0.5% Tween 20。

•在缺乏稳定剂的缓冲液（例如 PCR 缓冲液：10mM Tris-HCl，pH8.3,50mM KCl，1.5mMMgCl2）中，酶在升高温度时可以被快速灭活。

•热失活：95℃加热 2min。（若用于 RT-PCR，55℃加热 10min 进行热失活。）

产品信息

产品概述

Heat-labile UDG 由克隆有来自嗜冷海洋细菌 (psychrophilic marine bacterium)UDG基因的重组 E.coli 菌株表达并经过多步纯化精制得到。UDG(Uracil-DNA Glycosylase，尿嘧啶-DNA 糖基化酶)可催化水解含有 dU的DNA 单链或双链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的 N-糖苷键，释放游离尿嘧啶，由此产生的无碱基位点很容易被水解断裂。本品对高温敏感，50℃以上就可以使酶不可逆失活，适用于 PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR 体系。

运输与保存方法

≤0℃运输，-30 ~ -15℃保存。

单位定义

在 70 mM Tris-HCl，pH 7.5，10 mM NaCl，1 mM EDTA，100 μg/ml BSA 反应液中，37℃ 1 h 内使 1 nmol 的尿嘧啶从含 dU 的DNA 上释放所需要的酶量定义为 1 个活性单位(U)。

质量控制

 活力检测：≥200,000 U/mg

使用说明

去除单链或双链 DNA 尿嘧啶碱基；去除含dU 的 PCR 产物气溶胶污染。

产品信息

产品概述

RNase 抑制剂是从大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源 RNase 抑制剂，它通过非共价键方式1:1 与 RNase A、B 或 C 结合，从而抑制三种酶的活性，保护 RNA 不被降解。但对核糖核酸酶 1、核糖核酸酶 T1、S1 核酸酶、核糖核酸酶 H 和曲霉来源核糖核酸酶无效。RNase 抑 制 剂 经 过 RT-PCR 、 RT-qPCR 、IVT-mRNA 检验，能与各类商业化逆转录酶、各种 DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶兼容。与人源 RNase 抑制剂相比，鼠源 RNase 抑制剂不含两个对氧化非常敏感的半胱氨酸，因而具有更高的抗氧化性，使其在低浓度 DTT（小于 1 mM）下稳定。该特征使其适合用于不能添加高浓度 DTT 的反应（例如 Real-timeRT-PCR）。

产品储存

-25～-15℃储存，产品冻融次数≤5 次，有效期 1 年。

活性定义

抑制 5 ng RNase A 活性的 50%所需要的酶量定义为 1 个活性单位（U）。

蛋白分子量

RNase 抑制剂的分子量为 50 kDa。质量控制核 酸外 切 酶 活性 ： 40 U 的本 品和 1 μgλ-Hind III digest DNA 在 37℃下反应 16小时，DNA 的电泳谱带不发生变化；核酸内切酶活性：40 U 的本品和 1 μg λDNA在 37℃下反应 16 小时，DNA 的电泳谱带不发生变化；

切口酶活性：40 U 的本品和 1 μg pBR322 在37℃下反应 16 小时，DNA 的电泳谱带不发生变化；

RNase 活性：40 U 的本品和 1.6 μg MS2 RNA在 37℃下反应 4 小时，电泳谱带不发生变化；大肠杆菌 DNA 残留检测：40 U 本品中残留的核酸经 E.coli 16s rDNA 特异性的 TaqManqPCR 检测，E.coli 基因组残留≤0.1 pg/40 U。

产品应用

本产品可广泛应用于任何可能存在 RNase 干

1. cDNA 第一链合成，RT-PCR, RT-qPCR 等；

2. 在体外转录/翻译（如病毒体外复制体系）中保护 RNA，防止降解；

3. 在 RNA 分离纯化过程中抑制 RNase 的活性。

注意事项

1. 剧烈振荡或搅拌会导致酶失活；

2. 抑制剂的活性温度为 25～55ºC，温度≥65ºC 失活；

3. 不抑制 RNase H、RNase 1 及 RNase T1 活性；

4. 抑制 RNase 活性的 pH 范围较广（pH 5-9均有活性），在 pH 7-8 时表现最大活性。