氧化型辅酶NAD是脱氢酶的辅酶，如乙醇脱氢酶（ADH），用于氧化乙醇。它在糖酵解、糖异生、三羧酸循环及呼吸链中发挥着不可替代的作用。中间产物会将脱下的氢递给NAD，使之成为NADH+H。

而NADH+H则会作为氢的载体，在电子传递链中通过化学渗透偶联的方式，合成ATP。

在吸光方面，NADH在260nm和340nm处各有一吸收峰，而NAD+则只有260nm一处吸收峰，这是区别两者的重要属性。这同时也是很多代谢试验中，测量代谢率的物理依据。NAD在260nm的吸光系数为1.78*10L/(mol*cm)，而NADH在340nm的吸光系数为6.2*103L/(mol*cm)。

辅酶I（NAD），化学名为烟酰胺腺嘌呤二核甘酸或二磷酸烟苷，在哺乳动物体内存在氧化型（NAD+）和还原型（NADH）两种状态，是人体氧化还原反应中重要的辅酶。同时，它是辅酶I消耗酶（如NAD+依赖型ADP核糖基转移酶）的唯一底物，这类酶只能利于辅酶I（NAD+）为底物分解成ADP核糖和烟酰胺（Nam），在不同细胞中发挥不同生理功能。