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实施荧光定量PCR的原理及使用方法?

来源:yl23455永利官网生物市场中心 时间:2022-10-26 作者:yl23455永利 浏览量:94

荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。
原理: PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

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