核糖核酸酶RNase主要用途?
来源:yl23455永利官网生物市场中心 时间:2022-10-26 作者:yl23455永利 浏览量:137
1、从DNA:RNA杂交体中去除未杂交的RNA区。
2、确定RNA或DNA中的单碱基突变的位置。在RNA:DNA或RNA:RNA杂交体中,若存在单碱基错配,可用RNAseA识别并切割。通过凝胶电泳分析切割产物的大小,即可确定错配的位嚣。
3、RNA检测。RNA酶保护分析法(RNAseprotectionassay)是近年来发展起来的一种检测RNA的杂交技术。
其基本原理是利用单链RNA探针,与待测的RNA样品进行杂交形成RNA:RNA双链分子,由于RNA酶可专一性地降解未杂交的单链RNA,而双链受到保护不被降解,经凝胶电泳可以确定目的RNA的长度。
该方法灵敏度较Northern杂交法更高,并可进行较为准确的定量。选择适当的探针,还可进行基因转录起始位点分析及内含子(也称内元)剪切位点分析等研究。此法的灵敏度比核酸酶S1保护分析法高数倍。
4、降解DNA制备物中的RNA分子。须使用无DNAsd的RNAse(DNaseIfreeRNAse),市售的一般RNAseA常含有DNAse,可在100retool/ITris—CI(pH7.5)和15mmol/l。NaCI溶液中100℃加热15min,以去除之。