碱性磷酸酶来源是什么?
来源:yl23455永利官网生物市场中心 时间:2022-10-26 作者:yl23455永利 浏览量:127
碱性磷酸酶(AlkalinePhosphatase)基因来源于AntarcticBacteriumTAB5,在大肠杆菌中异源表达,该酶能够催化DNA和RNA的5′-或3′-磷酸单酯去磷酸化,也可以水解核糖、脱氧核糖核苷三磷酸(NTPs和dNTPs)。它作用于5’突出末端、5’凹陷末端和平齐末端。
TAB5碱性磷酸酶可应用于许多分子生物学实验中如克隆或探针末端标记等,以用来去除DNA或RNA磷酸化的末端。在克隆实验中,去磷酸化后可以阻止线性化质粒DNA再自连接。它还可以用来降解PCR反应体系中残留的dNTPs,以为DNA测序准备模板。
TAB5碱性磷酸酶在70℃下加热5min就会完全不可逆失活,所以在开始连接反应或末端标记实验之前无需对该酶进行去除操作。
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