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产品描述
对糖蛋白的糖基化研究必不可少的第一步通常都是除去所有非还原末端的唾液酸残基。α2-3,6,8 Neuraminidase 是一种高纯度和高稳定性的外切糖苷酶,适用于蛋白质组学及糖生物学研究中糖蛋白上所有非还原末端的唾液酸残基有效释放。α2-3,6,8Neuraminidase 能够切割释放 α2-3,α2-6,α2-8唾液酸残基。
技术指标
外观:无色液体;蛋白纯度: ≥95%(SDS-PAGE);比活性: ≥50000 U/mL; PNGase F: 无法检测到任何活性.
酶学性质
来源:微生物;分类: EC 3.2.1.18;分子量:43 kDa(SDS-PAGE);等电点:5.5;最适:pH 6.0;最适温度:45℃;底物选择性:Sialyl-α2,3-lactose(100%);Sialyl-α2,6-lactose(17%);Neu5Ac-α-4MU(74%);糖蛋白水解位点:α2-3,6,8 Neuraminidase能够切割释放α2-3,α2-6,α2-8唾液酸残基.
用途
用于释放糖蛋白、糖脂、神经节苷脂及多糖上所有直链或支链非还原末端的唾液酸残基。
酶活定义
单位酶活定义为在下述条件下,每分钟水解1μmol的唾液酸所需要的酶量。
试剂准备
试剂I:50mM 磷酸钾缓冲液,pH 7.5。
试剂II:8.0mM 唾液乳糖 (N-Acetylneuraminosyl-D-lactose):
52.5mg 3′-Sialyllactose 溶于 10mL 预冷的试剂I,冰浴备用。
试剂III:100U/mL NAL:用预冷的试剂I将唾液酸醛缩酶(N-acetylneuraminic acidaldolase)稀释至100U/mL,冰浴备用,4℃保存。
试剂Ⅳ:100U/mL LDH:用预冷的试剂I将 L-LDH (L-乳酸脱氢酶)稀释至100U/mL,冰浴备用,4℃保存。
试剂Ⅴ:2.5mM NADH:17.8mg NADH 溶于 10mL 去离子水,分装后,-20℃ 保存;临用前解冻,冰浴备用。
试剂Ⅵ:酶稀释液:500mg BSA 溶于 100mL
试剂I中,至终浓度为 0.5%(W/V),冰浴备用,4℃ 保存。
待测样品:用预冷的试剂VI将酶液稀释至 0.1-0.25U/mL。
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