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一步法快速多重检测试剂盒 (探针法)

英文名称:One Step RT-qPCR Probe Kit U+ (Fast)
货号: HMD3910-01 HMD3910-02 HMD3910-03
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中文:一步法快速多重检测试剂盒 (探针法)
英文:One Step RT-qPCR Probe Kit U+ (Fast)
货号: HMD3910-01
规格:100 rxns
中文同义词:一步法快速多重检测试剂盒 (探针法)

产品信息


产品名称

货号

规格

一步法快速多重检测试剂盒(探针法)

HMD3910-01

100 rxns

HMD3910-02

1,000 rxns

HMD3910-03

10,000 rxns


产品概述

一步法快速多重检测试剂盒(探针法)是以RNA 为模板的一种探针法多重荧光定量 PCR 试剂盒。本产品可用于快速扩增,可以在短时间 内 完成 多 重 扩 增。 同 时 本产 品 含 有UDG/dUTP 防污染系统,可在室温下消除扩增产物的污染。


产品组分

组分

100

rxns

1,000

rxns

10,000

rxns

5×RT-qPCR

buffer (U+)

0.4 mL

4 mL

40 mL

Enzyme mix (U+)

80 μL

800 μL

8 mL


运输与保存方法

≤0℃运输;-25~-15℃保存。

注意事项

5×RT-qPCR buffer (U+)在使用前请充分混匀,解冻后如有沉淀待试剂恢复到室温后混匀溶解即可正常使用。在实验配制过程中请使用RNase free 枪头、EP 管等.


试剂准备

组分

体系

5×RT-qPCR buffer (U+)

4 μL

Enzyme mix (U+)

0.8 μL

Primer Forward

0.1~1.0 μM

Primer Reverse

0.1~1.0 μM

TaqMan Probe

0.05~0.25 μM

RNA 模板

X μL

RNase Free Water

Up to 20 μL


注:引物探针浓度可根据实验进行调整。


步骤

循环数

温度

时间(min:sec)

升降温速率

逆转录 a

1

55℃

10:00

1.6℃/s

预变性

1

95℃

00:30

1.6℃/s

扩增 b

45

95℃

00:10

1.6℃/s

60℃

00:30

1.6℃/s


快速扩增程序


步骤

循环数

温度

时间(min:sec)

升降温速率

逆转录 a

1

55℃

05:00

6.1℃/s

预变性

1

95℃

00:05

6.1℃/s

扩增 b

43

95℃

00:03

6.1℃/s

60℃

00:10

6.1℃/s


a. 逆转录温度 45~55℃均可,提高温度有助于复杂二级结构和高 CG 区域模板的扩增;

b. 最适退火/延伸温度根据引物的 Tm 值调试,荧光采集时间需要根据使用的 Real Time PCR 仪器的最短数据采集时间调整。




Q:Universal TaqMan Multiplex qPCR One-Step Master Mix (UDG plus)

产品概述


Universal TaqMan Multiplex qPCR One-Step Master Mix(UDG plus) 是 以 RNA 为模板的一种多重荧光定量 PCR 试剂盒。在反应过程中, 逆转录和定量 PCR 在一管内完成,简化了实验操作。本产品含有UDG 酶,能有效防止扩增产物气溶胶污染的风险。本试剂盒选用耐热逆转录酶可高效合第一条链 cDNA,并且选用最佳比例的 HotStart Taq DNA 聚 合 酶 ( 抗 体 修 饰 ) 和RNase 抑制剂,配合添加抑制非特异性扩增及提升多重定量扩增效率的增强剂缓冲液体系,检测灵敏度可达 0.1 pg,能够提供稳定可靠的扩增,可进行多达四重的反应。


a. 2×One Step Buffer 包 含 dNTP Mix 、Mg 2+。

b.Enzyme Mix(UDG plus) 主要包含反转录酶、Hot Start Taq DNA 聚合酶(抗体修饰)、RNase 抑制剂及 UDG 酶。

c.ROX: 需根据检测仪器机型自行选择校正。

运输与保存方法

≤0℃运输;-25℃~-15℃保存。


在实验过程中请使用 RNase free 耗材。

反应体系

Q:UniV2 TaqMan Multiplex RT-qPCR Master Mix

产品信息




产品概述

Multiplex One Step RT-qPCR Master Mix(UDG Plus)是以 RNA 为模板进行多重定量PCR 反应的 mix。在实验的过程中,逆转录和定量 PCR 在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。本产品利用耐热逆转录酶高效合成第一链cDNA , 并 利 用 HotStart Taq DNAPolymerase 进行定量扩增。本产品主要包含优 化 的 Buffer ( 含 dNTP 和 Mg 2+ ) 及Enzymes Mix(含 HotStart Taq 酶、耐热逆转录酶、UDG 酶等),能够在保证引物扩增效率的同时进行多重扩增反应;dUTP /UDG系统可有效防止气溶胶污染的风险。



适用机型

1) 需添加 High Rox 适用机型ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900 HTFast,StepOne™, StepOne Plus™

2) 需添加 Low Rox 适用机型ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7,QuantStudio™3and5, QuantStudio™6,QuantStudio™7, QuantStudio™12k FlexStratagene MX3000P™, MX3005P™,MX4000P™

3) 不需要 Rox 校正的仪器型号Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™,iCycler iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™,Opticon®, Opticon®2, Chromo4™Eppendorf Mastercycler®ep realplex,realplex2 sQiagen Corbett Rotor-Gene®Q,Rotor-Gene®3000, Rotor-Gene®6000Roche Applied Science LightCycler®480,LightCycler®2.0,Lightcycler®96Thermo Scientific PikoReal CyclerCepheid SmartCycler®Illumina Eco qPCR

运输及保存方法

冰袋运输。-25~-15℃保存,有效期 1 年。本

品避免反复冻融。建议分装保存。

注意事项

1. 实验过程中请使用 RNase free 耗材。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Q:非洲猪瘟检测试剂盒 (UDG plus)

产品信息




产品概述

非洲猪瘟检测试剂盒(UDG plus)是针对ASFV 开发的一款多重荧光定量 PCR 试剂盒,其搭配了经升级改造的 Taq DNA 聚合酶,对模板类型、模板 GC 含量和引物 Tm 值具有更高的兼容性。过高特异性抗体封闭其在低温及室温下的 5’→ 3’的聚合酶活性和双链特异性 5’→ 3’的核酸外切酶活性,经过 95℃热激活 30s 后,抗体脱落释放酶活。在扩增体系配制至 PCR 扩增前,不会产生由于引物错配而形成的非特异性扩增,最大程度降低非特异扩增和引物二聚体的形成,提高检测的灵敏度和特异性。该产品引入 UDG 防污染体系,能有效防止扩增产物气溶胶污染。经过特殊优化的反应缓冲液,与热启动 Taq DNA 聚合酶(抗体修饰)制成预混试剂,最大限度保证了储存过程中酶的稳定性,配置体系前只用加入引物模板以及水,大大简化了配制步骤。


运输与保存方法

≤0℃运输;-15℃~-25℃保存。


注意事项

•操作过程中请使用 RNase free 耗材

•吸取反应液时应尽量避免气泡,进行上机时请检查 PCR 管管盖是否盖紧以避免液体蒸发导致的结果不准确及扩增产物污染

•样本前处理应在生物安全柜进行,实验过程中使用的吸头应直接打到 10%次氯酸废液缸中,反应结束后的 PCR 管切勿开盖,需与其它废弃物灭菌后丢弃

•试剂使用前请充分融化混匀,不同批号试剂不宜混合使用

Q:低拷贝热启动Taq DNA聚合酶探针法预混液(抗体修饰) V2

产品信息



产品概述

低拷贝热启动 Taq DNA 聚合酶探针法预混液(抗体修饰)V2 是一款适用于探针法的 Realtime PCR (qPCR)反应的通用试剂。2 ×HSProbe Mix 包含了除模板,引物,探针 外所有 的 组 分 。 优 选 的 热 启 动 Taq DNApolymerase,配合针对低拷贝模板而优化的缓冲液,可以有效抑非特异性扩增,大大增加 qPCR 扩增效率以及检测灵敏度,适用于进行高灵敏度的 qPCR 反应。参比染料 rox 随试剂盒提供。 本产品使用前只需要加入引物、模板、探针、ROX(根据使用的机型而定)、水;利用本产品可在广泛的定量区域内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确的定量、定性和 SNP 检测,具有重复性好、可信度高、并兼容各种不同类型的 qPCR 探针的特点。


产品性质

1.基因表达分析

2.低拷贝基因检测

3.SNP 和等位基因分型

4.测序和微阵列结果的验证


运输及保存方法

≤0℃运输;-25~-15℃恒温冷冻冰箱避光保存,避免反复冻融。

Q:热启动Taq DNA聚合酶探针法预混液(抗体修饰) V2

产品概述

热启动 Taq DNA 聚合酶预混液(抗体修饰)V2是一款使用超高性能热启动Taq Pro DNA聚合配置的即用型 PCR Mix,能快速、高效合成 DNA,且能有效耐受各种抑制剂,对于其他粗提样本或抑制剂高的样本均能有效扩增。能直接扩增提纯 DNA、粗提 DNA、菌液等样本。 该 PCR Mix 中的聚合酶使用抗体进行封闭,90℃以上 30 秒即可恢复酶活性。该酶催化 5'→3' 方向合成 DNA,有 5'→3'外切酶活性,无 3'→5'校正外切酶活性。本产品在扩增产物具有 3'-dA 突出末端,纯化后可直接用 TA 载体克隆。扩增速度 1-10s/kb。


产品性质

1. 优化的 Taq Pro DNA 聚合酶显著耐受各种抑制因子,有效扩增 GC 含量高、二级结构等复杂模板。

2. 可用于菌液、菌落以及粗提取样本的直扩,省时高效。

3. 预混液的形式,使用更加便捷。


运输及保存方法

≤0℃运输;-25~-15℃恒温冷冻冰箱避光保存,避免反复冻融。

质量控制

SDS-PAGE 检测纯度大于 99%,经检测无外源核酸酶活性; PCR 方法检测无宿主残余DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。

使用说明

1、操作步骤(20 μL 反应体系为例)

1.1 使用试剂前确保彻底融化并混匀,加入反应体系的所有模板、引物等组分也应充分混匀;

1.2 计算所加各组分的体积(参考下面表格),并小心吸取准确体积到 PCR 反应管内,(注意稠液体需尽量减少黏附);

1.3 盖好 PCR 管盖,瞬时离心。

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