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产品描述
本产品中包含反应缓冲液、Bst DNA 聚合酶和耐热型反转录酶的 RT-Enzymes Mix、冻干保护剂和荧光染料组分。其中反应缓冲液中含Mg2+,dNTP 等扩增必须组分。产品为冻干球剂型,使用时只需要加入引物和模板即可。产品组分组分 HMD 5209-01, HMD 5209-02; HMD 5209-03。
应用:适用于 DNA、RNA 等温扩增。运输与保存方法:2~8℃ 运输,2~8℃ 保存;产品有效期 12 个月。
实验流程
1)根据测试数取出相应个数的冻干球。
2)反应体系配制
备注:
a.10×Primer Mix浓度:16μM FIP/ BIP,2μMF3 / B3,4μM Loop F /B;
b.核酸模板建议使用 DEPC 水溶解。
3)扩增反应
在荧光PCR仪(如 ABI 7500 等)上设置如下程序
注意事项
1)反应温度可根据引物情况在 62℃ – 68℃ 间进行优化;
2)实验应规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样等过程;
3)为避免污染,建议在超净台中配制反应体系,在其他房间的通风橱中加入模板以免产生假阳性干扰。
产品描述
本产品中包含反应缓冲液、BstL DNA 聚合酶和耐热型反转录酶的 RT-Enzymes Mix、冻干保护剂和荧光染料组分。其中反应缓冲液中含 Mg2+,dNTP 等扩增必须组分,使用时只需要将 Buffer、反应酶、荧光染料、引物混合并加入模板即可;若添加冻干保护剂可进一步配置可冻干体系。
应用:适用于 DNA、RNA 等温扩增。运输与保存方法:干冰运输,-25~-15℃ 保存。避免反复冻融,产品有效期12月。
实验流程
1)将 Buffer 取出解冻,使用前充分涡旋混匀,并短暂离心收集液体至管底。
2)反应体系按下表配制
备注:
10×Primer Mix 浓度:16μM FIP/BIP,
2μM F3/B3,4μM Loop F/B。核酸模板建议使用 DEPC 水溶解。
3)扩增反应:在荧光 PCR 仪(如ABI7500等)上设置如下程序。
注意事项
1)Buffer 融化后可能会有白色沉淀,在室温下充分混匀即可澄清。
2)反应温度可根据引物情况在 62℃-68℃ 间进行优化。
3)实验应规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样等过程。为避免污染,建议在超净台中配制反应体系,在其他房间的通风橱中加入模板以免产生假阳性干扰。
产品描述
本产品组分中已包含反应缓冲液,Mg2+,dNTP,显色染料,BstL DNA 聚合酶和耐热型反转录酶,使用时只需要将反应酶,Buffer, 引物混合并加入模板即可。
本产品为红黄变色反应,在扩增完成后,阳性结果为黄色,阴性结果为红色,通过肉眼观察即可对反应结果进行判读。
应用
适用于 DNA、RNA 等温扩增。
运输与保存方法
冰袋运输,-25~-15℃ 保存。避免反复冻融,产品有效期 12 月。
实验流程
1)将 Buffer 取出,冰上解冻,使用前涡旋10 s混匀,并短暂离心收集。
2)反应体系按下表配制:10×Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16μM,LoopF/B 分别为 4μM,F3/B3 分别为 2μM。
3)65°C 恒温孵育 30-45min,可根据颜色变化适当延长反应时间。
4)肉眼观察结果,黄色为阳性,红色为阴性。
注意事项
1.Buffer 需要在室温充分融化,使用完毕后于 -25~-15℃ 保存。
2.分装后的试剂应避免长时间暴露于空气中。
3.红黄变色反应依赖反应体系的pH变化,请不要使用含Tris的核酸保存溶液,建议使用 ddH2O 保存的核酸。