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产品描述
PNGase F 是从糖蛋白中去除几乎所有N-糖链的最有效的方法。PNGase F 是一种酰胺酶,切割糖蛋白上的 N- 连接糖链。切割的糖型有:高甘露糖、杂合和复杂寡糖;切割位点为:最内侧的N-乙酰葡糖胺和天冬酰胺之间的糖苷键。
技术指标
外观:无色液体;蛋白纯度:≥95%(SDS-PAGE);比活性:≥500,000 U/mL
酶学性质
来源:微生物;分类: EC 3.5.1.52; 分子量; 35 kDa(SDS-PAGE); 等电点: 8.14; 最适pH: 7.0-8.0; 最适温度:65℃; 底物选择性水解蛋白质的 Asn 相连的 N- 糖链,使N-聚糖保持完整。糖蛋白水解位点除含 α1-3 岩藻糖苷键外,能切割所有N-糖链。激活剂 :DTT; 抑制剂:SDS; 储存温度: -25~-15°C; 失活条件:含1μL PNGase F 的 20μL 反应混合物在 75°C 孵育 10min 即可失活。
用途: 用于从糖蛋白中去除N-糖链。
酶活定义: 单位酶活定义为在下述条件下,10μL 的反应体系中,37°C 反应 1 小时从 10μg 变性 RNase B中除去超过 95% 的碳水化合物所需要的酶量。
操作步骤
1.用去离子水溶解 1-20μg 的糖蛋白,加入 1μL 的 10×Glycoprotein Denaturing Buffer,用去离子水定容到 10μL;
2.100°C 孵育 10 min;
3.加入 2μL 的 10×Glyco Buffer 2,2μL 的 10% NP-40 ,轻轻吹打混匀;
4.加入 1-2μL 的 PNGase F,加去离子水到20μL,轻轻吹打混匀;
5.37°C 孵育 60 min;
6.用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。
产品描述
PNGase F 是从糖蛋白中去除几乎所有N-糖链的最有效的方法。PNGase F 是一种酰胺酶,切割糖蛋白上的N-连接糖链。切割的糖型有:高甘露糖、杂合和复杂寡糖;切割位点为:最内侧的N-乙酰葡糖胺和天冬酰胺之间的糖苷键。
技术指标
外观:无色液体;蛋白纯度: ≥95%(SDS-PAGE);比活性: ≥500,000 U/mL
酶学性质
来源:微生物;分类: EC 3.5.1.52;分子量; 35 kDa(SDS-PAGE); 等电点:8.14; 最适pH:7.0-8.0;最适温度: 65℃; 底物选择性水解蛋白质的 Asn 相连的 N- 糖链,使N-聚糖保持完整。糖蛋白水解位点除含 α1-3岩藻糖苷键外,能切割所有N-糖链。激活剂: DTT; 抑制剂:SDS; 储存温度: -25~-15°C; 失活条件:含1μL PNGase F 的 20μL 反应混合物在 75°C 孵育1 0min 即可失活。
用途:用于从糖蛋白中去除 N- 糖链。
酶活定义: 单位酶活定义为在下述条件下,10μL 的反应体系中,37°C 反应 1 小时从 10μg 变性 RNase B 中除去超过 95% 的碳水化合物所需要的酶量。
操作步骤
1.用去离子水溶解 1-20μg 的糖蛋白,加入 1μL 的 10×Glycoprotein DenaturingBuffer,用去离子水定容到 10μL;
2.100°C 孵育 10 min;
3.加入2μL 的 10×GlycoBuffer 2,2μL 的 10% NP -40,轻轻吹打混匀;
4.加入 1-2μL 的 PNGase F,加去离子水到 20μL,轻轻吹打混匀;
5.37°C 孵育 60 min;
6.用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。