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中文：肌酸脒基水解酶CR-T
英文：CR-T
CAS：37340-58-2
分子式：48 kDa(SDS-PAGE)
纯度：≥90%
货期：24h
货号：HH0201-01
规格：5ku
中文同义词：肌酸酶; 肌氨酸酶; 肌酸脱水酶;
英文同义词：EC3.5.3.3; CREATINASE; Creatinase/Aminidase;
技术指标
外观：白色无定型冻干粉末；蛋白纯度：≥90%；比活性：≥6 U/mg 酶粉；过氧化氢酶：≤0.03%；肌酐酶：≤0.01%；肌氨酸氧化酶：≤0.01%；NADH 氧化酶：≤0.01%
酶学性质
来源：微生物；分类：EC 3.5.3.3；分子量：48 kDa(SDS-PAGE)；等电点：4.6；Km值：1.7×10-2 M(Creatine)；抑制剂：Ag+，Cu2+，Hg2+；最适：pH 7.5；最适温度：45-50℃；pH 稳定性4.5-10.0(25℃,16 h)；热稳定性 50℃以下稳定 (pH 7.5,30 min)；稳定性：-25～-15℃ 静置保存 12 个月保持90%以上活性；保护剂：EDTA 及糖类物质
用途：水解肌酸，用于酶法肌酐试剂的研发和大量配制。
尿素（Urea）和 DAB（ρ-dimethylaminobenzaldenhyde）反应形成的黄色染料的量可通过分光光度计在 435 nm 检测。
酶活定义：单位酶活定义为在下述条件下，每分钟催化反应生成 1 μmol 肌酸完全转化为肌氨酸所需的酶量。
试剂准备
试剂I：0.1 M肌酸溶液。
试剂II：将 2.0 g DAB溶解在100 mL 二甲亚砜中，并加入 15 mL 浓盐酸。
酶稀释液：50 mM PBS，pH 7.5, 样品用酶稀释液将酶稀释至 2.0-3.0 U/mL。
操作步骤
1. 取1 mL试剂I于5 mL EP管中，37℃预热5min。
2. 加入0.1 mL酶液，混匀。
3. 37℃ 水浴反应 10 min 后，加入 2.0 mL 试剂II终止反应，并在 25℃ 放置 20 min。
4. 使用紫外分光光度计，测定反应液在435nm处吸光度值。
5. 酶稀释液代替酶液作为空白对照。
活力计算
3.1：反应液总体积（mL）；
0.1：酶液体积（mL）；
10：反应时间（min）；
1.0：光路长度(cm)；
df：稀释倍数；
C：酶浓度(mg/mL)；
0. 321：黄色染料在 435 nm 处毫摩尔吸光系数(cm2/μmol)。
技术指标
外观：白色无定型冻干粉末；蛋白纯度：≥90%；比活性：≥4 U/mg酶粉；过氧化氢酶：≤0.03%；肌酐酶：≤0.01%；肌氨酸氧化酶：≤0.01%；NADH氧化酶：≤0.01%
酶学性质
来源：微生物；分类：EC 3.5.3.3；分子量：48 kDa (SDS-PAGE)；等电点：4.6；Km值：1.7×10-2 M(Creatine)；抑制剂：Ag+，Cu2+，Hg2+；最适：pH 7.5；最适温度：45-50℃；pH稳定性4.5-10.0(25℃,16 h)；热稳定性 50℃ 以下稳定(pH 7.5,30 min)；稳定性：-25～-15℃静置保存12个月保持90%以上活性；保护剂：EDTA及糖类物质
用途
水解肌酸，用于酶法肌酐试剂的研发和大量配制。
尿素（Urea）和 DAB（ρ-dimethylaminobenzaldenhyde）反应形成的黄色染料的量可通过分光光度计在 435 nm 检测。
酶活定义
单位酶活定义为在下述条件下，每分钟催化反应生成 1μmol 肌酸完全转化为肌氨酸所需的酶量。
试剂准备
试剂I：0.1 M 肌酸溶液。
试剂II：将 2.0 g DAB 溶解在 100 mL 二甲亚砜中，并加入 15 mL 浓盐酸。
酶稀释液：50 mM PBS，pH 7.5, 样品用酶稀释液将酶稀释至 2.0-3.0 U/mL。
操作步骤
1. 取 1 mL 试剂I于 5 mL EP 管中，37℃ 预热 5 min。
2. 加入0.1 mL 酶液，混匀。
3. 37℃ 水浴反应 10 min 后，加入 2.0 mL 试剂II终止反应，并在 25℃ 放置 20 min。
4. 使用紫外分光光度计，测定反应液在435nm处吸光度值。
5. 酶稀释液代替酶液作为空白对照。
活力计算
3.1：反应液总体积（mL）；
0.1：酶液体积（mL）；
10：反应时间（min）；
1.0：光路长度(cm)；
df：稀释倍数；
C：酶浓度 (mg/mL)；
0.321：黄色染料在 435 nm 处毫摩尔吸光系数 (cm2/μmol)。
