在提取总RNA和反转录的过程中,如何避免RNase的污染?
来源:yl23455永利官网生物市场中心 时间:2022-10-26 作者:yl23455永利 浏览量:113
实验用到的试剂和耗材如指管和移液枪头都要求是无RNase污染的,或者DEPC处理过的(注意含Tris的溶液不能直接用0.1%DEPC处理,详见Tips)。戴手套,不小心接触各种表面后,比如桌面啊,冰箱把手啊,门啊什么的,要勤换手套。
生物通ebioTips3:DEPC(Diethylpyrocarbonate)是强RNAse抑制剂。0.1%DEPC处理溶液或者器皿表面,可以通过共价修饰使RNase失活。DEPC按照0.1:100的比例加入试剂中,37度保温12小时,高温消毒15分钟可以除去DEPC残留,最后得到DEPC处理过的溶液,这个浓度对于一般的实验室内去RNase污染处理已经足够,对于RNase特别高的溶液则可能需要提高DEPC处理浓度。
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