核糖核酸酶A（RNaseA）来源于牛胰脏，是一种内切核糖核酸酶，可特异攻击RNA上嘧啶残基的3’端，切割胞嘧啶或尿嘧啶与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键，反应终产物是3’嘧啶核苷酸和末端带3’嘧啶核苷酸的寡核苷酸。无辅助因子及二价阳离子存在时，核糖核酸酶A的作用可以被胎盘RNA酶抑制剂（RNasin）或氧钒一核糖核苷复合物（vanadyl—ribonuclosidecomplex，VRC）所抑制。RNaseA的反应条件极广，且极难失活。在低盐浓度（0～100mmol/lNaCl）下，RNaseA切割单链和双链RNA、DNA：RNA杂交体中的RNA；当NaCl浓度为300mmol/l。或更高时，RNaseA就特异性切割单链RNA。去除反应液中的RNaseA，通常需要蛋白酶K处理、酚反复抽提和乙醇沉淀。