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中文：嘌呤核苷酸磷酸化酶
英文：PNP
CAS：9030-21-1
分子式：C5H6ClN3
纯度：≥90%
货期：24h
货号：HH4401-01
规格：3ku
中文同义词：核苷磷酸化酶; 嘌呤核苷磷酸化酶;核苷磷酸化酶 细菌;
英文同义词：2-Chloro-4, 5-diaminopyridine 3, 4-Pyridinediamine,
技术指标
外观:白色无定型粉末;蛋白纯度:≥90%;比活性:≥150 U/mg酶粉;核苷酶:≤0.01%;腺苷脱氨酶:≤0.1%
酶学性质
来源:微生物;分类:EC 2.4.2.1;分子量:29 kDa(SDS-PAGE);等电点:5.3;Km值:1.4×10-4 M(Inosine)，7.4×10-5 M（Pi）;抑制剂:不受NaN3抑制;最适pH:7.0;最适温度:65℃;pH稳定性:5.5-10.0(25℃,16h);热稳定性60℃以下稳定(pH 8.5,30 min);稳定性:-25～-15℃静置保存12个月保持90%以上活性;保护剂:BSA.
用途: 用于5’-NT,ADA等试剂的研发和大量配制。
酶活定义
单位酶活定义为在下述条件下，每分钟生成1μmol次黄嘌呤所需的酶量。
试剂准备
试剂I：称取 0.0372 g EDTA·2Na 溶于 40mL0.1M pH 7.5 磷酸钾缓冲液，加入 0.07g 胆酸钠，1mL 4-AA(50mM)，调节 pH 至7.5，加入 200U 黄嘌呤氧化酶，用 0.1M pH 7.5 磷酸钾缓冲液定容至 50mL。
试剂II：在 40mL 水中，加入 0.39g NaH2PO4，0.57 g K2HPO4，调节pH至7.7，加入0.161g 肌苷，9.5mL TOOS (50mM)，0.5mLPOD(1kU/mL)，调节pH至7.7，用水定容至50mL。
酶稀释液：在 50mL 0.1M 磷酸钾缓冲液（pH7.5）中，加入0.0372g EDTA·2Na，0.07g胆酸钠。
样品：用酶稀释液将酶稀释至0.2-0.3 U/mL。
操作步骤
1.向1 mL比色皿中加入0.75 mL 试剂I，0.15mL 试剂 II，37℃ 预热 5 min。
2.加入0.015 mL 待测酶液，混匀。
3.37℃ 反应，用分光光度计在555 nm检测样品1 min内的吸光度变化（ΔAs）
*用酶稀释液替代酶液，其它步骤相同，所得溶液吸光度为空白吸光度（ΔAb）ΔA=ΔAs-ΔAb
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