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  • RNase lnhibitor是什么?
    RNA酶抑制剂,在提取RNA的时候用到的因为降解RNA的酶无处不在,所以为了提取到完整有功能性的RNA,就需要加入RNA酶抑制剂,以防止RNA的降解。
  • 在提取总RNA和反转录的过程中,如何避免RNase的污染?
    实验用到的试剂和耗材如指管和移液枪头都要求是无RNase污染的,或者DEPC处理过的(注意含Tris的溶液不能直接用0.1%DEPC处理,详见Tips)。戴手套,不小心接触各种表面后,比如桌面啊,冰箱
  • RNase抑制剂的常用的RNase抑制剂?
    1、焦碳酸二乙酯(DEPC):是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂,他通过和RNA酶的活性基因团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性。 2、异硫氰酸胍:目前认为是最有效的RNA酶抑制剂,它在
  • 常用rnase抑制剂是什么?
    RNase Inhibitor(Ribonuclease Inhibitor),即RNases抑制剂,是一种大肠杆菌表达的重组蛋白,编码基因来源于人类胎盘素,可以通过非竞争性方式按1:1比例和RNas
  • 半定量RT-PCR和定量RT-PCR的区别?
    半定量RT-PCR与定量RT-PCR的区别是半定量RT-PCR操作简便,可快速推测样品中特异mRNA的相对数量;而定量RT-PCB可实时定量,较半定RT-PCB更准确。 半定量反转录-聚合酶链反应(s
  • 一步法RT-PCR 流程和注意事项?
    RT-PCR实验有三步:抽提RNA,RT,PCR。要求: 1.做RT前必需测RNA浓度,逆转录体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug。 2. RT按要求做,一般不会出太大问题。3. PC
  • RT-PCR实验操作的注意事项?
    在做Northern等杂交实验、构建cDNA文库、获取能够编码真核生物蛋白的基因、获得RNA病毒基因时,会用到RNA提取和RT-PCR技术。 真核生物的基因组是DNA,为什么不直接从DNA PCR得到
  • RT-PCR中用一步法还是两步法好一些?
    一步法RT-PCR在处理大量样品时易于操作,有助于减少残余污染,因为在cDNA合成和扩增之间不需要打开管盖.一步法可以得到更高的灵敏度,最低可以达到0.1pg总RNA,这是因为整个cDNA样品都被扩增
  • 实施荧光定量PCR的原理及使用方法?
    荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。 原理: PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探
  • 实时荧光定量PCR,是一步法好还是两步法好?
    一步法实时荧光定量PCR从方便性上来说肯定是更方便的,但是有时候一步法往往达不到两步法那么好的效果,所以具体还是看你的需求。
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